飼料中水分(fen)的測(ce)定方法(fa)

1、適用范圍：本(ben)標準(zhun)適用于(yu)測定配(pei)合(he)飼(si)料和單一飼(si)料中水分(fen)含量(liang)，但(dan)用作(zuo)飼(si)料的奶(nai)制品，動物和植物油脂，礦物質除外。

2、原理: 試(shi)樣在105±2℃烘箱內，在大(da)氣壓下烘干，直至(zhi)恒(heng)重，逸失的重量為水分

3、儀器設備

實驗室(shi)用樣品粉碎機或研缽。

分樣篩：孔徑0.45毫米（40目(mu)）

分析天秤：感量0.0001克。

電熱式恒溫烘箱：可控制溫度為(wei)105±2℃。

稱(cheng)樣皿(min)：玻璃或鋁質，直(zhi)徑40毫米以上(shang)，高25毫米以下(xia)。

干燥(zao)(zao)器：用(yong)氯(lv)化鈣（干燥(zao)(zao)試劑）或變色硅膠作干燥(zao)(zao)劑。

4、試(shi)樣的選取和制備

選取有代表性的試(shi)樣(yang)(yang)(yang)，其原始(shi)樣(yang)(yang)(yang)量(liang)應在1000g以上用(yong)(yong)四(si)(si)分法將原始(shi)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)縮減至(zhi)(zhi)500g，風干(gan)后粉(fen)碎至(zhi)(zhi)40目(mu)，再用(yong)(yong)四(si)(si)分法縮至(zhi)(zhi)200g，裝入密封(feng)容器，放陰涼(liang)干(gan)燥處保存。如試(shi)樣(yang)(yang)(yang)是多汁(zhi)的鮮樣(yang)(yang)(yang)，或無法粉(fen)碎時(shi)應預先干(gan)燥處理，稱(cheng)取試(shi)樣(yang)(yang)(yang)200~300g，在105℃烘箱中(zhong)烘15分鐘，立即降(jiang)至(zhi)(zhi)65℃，烘干(gan)5~6小時(shi)，取出后，在室內空氣中(zhong)冷(leng)卻4小時(shi)，稱(cheng)重，即得風干(gan)試(shi)樣(yang)(yang)(yang)。

5、測定步驟

潔凈稱(cheng)樣(yang)皿，在105±2℃烘(hong)箱中烘(hong)1小時，取(qu)出在干(gan)燥器(qi)中冷卻30分(fen)鐘(zhong)，稱(cheng)準至0.0002克，再烘(hong)干(gan)30分(fen)鐘(zhong)，同樣(yang)冷卻，稱(cheng)重(zhong)，直至兩次重(zhong)量之(zhi)差小于0.0005克為恒(heng)重(zhong)。

用(yong)已恒重稱(cheng)樣(yang)(yang)皿(min)稱(cheng)取(qu)(qu)兩份(fen)平(ping)行樣(yang)(yang)，每份(fen)2~5克(ke)含水量(liang)0.1克(ke)以上，樣(yang)(yang)品厚度4毫(hao)米以下(xia)，準確至(zhi)0.0002克(ke)，不蓋稱(cheng)樣(yang)(yang)皿(min)蓋，在105±2℃烘箱(xiang)中烘烘3小時，以溫(wen)度到達105℃開始(shi)計時，取(qu)(qu)出蓋好稱(cheng)樣(yang)(yang)皿(min)蓋，在干燥(zao)器(qi)中冷卻30分鐘(zhong)，稱(cheng)重。

再同樣(yang)烘干1小時，冷卻，稱重(zhong)，直(zhi)至兩次稱重(zhong)之重(zhong)量差小于(yu)0.002克。

測定結果的計算

計算公(gong)式(shi)：水(shui)分（%）=（W1—W2）/（W1—W0）×100

式中：W1—105℃烘干前的試樣(yang)(yang)及稱樣(yang)(yang)皿的重量，g；

W2—105℃烘干(gan)后試樣及(ji)稱(cheng)樣皿的重量，g；

W0—已恒重的稱樣皿(min)的重量，g。

重復性

每(mei)個試樣(yang)，應(ying)取兩(liang)個平(ping)行(xing)樣(yang)進行(xing)測定，以(yi)其算(suan)術平(ping)均值(zhi)為(wei)結(jie)果，兩(liang)個平(ping)行(xing)樣(yang)測定值(zhi)相差不得超過(guo)0.2%，否則重做。

6、注意事項

1）如果試樣進行過預先干燥(zao)處理，應按下(xia)式計算原來試樣的所含水分總量：

原(yuan)試樣(yang)總水分（%）=預干(gan)燥減重(zhong)（%）+[100—預干(gan)燥減重(zhong)（%）] ×風(feng)干(gan)試樣(yang)水分（%）

2）某些(xie)含脂肪(fang)高(gao)的樣品，烘干(gan)時間長反而增重(zhong)，乃脂肪(fang)氧化所(suo)致，應以增重(zhong)前那次重(zhong)量(liang)為準。

3）含糖分高(gao)的(de)易分解或易焦化試樣，應使用減壓干燥法（70℃，600mm汞(gong)柱以下，烘干5小時(shi)）測定(ding)水(shui)份。

試樣經(jing)灼(zhuo)燒(shao)完全后，余下(xia)的(de)(de)(de)殘留物(wu)質（如氧(yang)化物(wu)和(he)(he)鹽）稱為灰分(fen)(fen)。灰分(fen)(fen)有水(shui)溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)與水(shui)不溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)，酸溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)、酸不溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)。水(shui)溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)灰分(fen)(fen)大部(bu)分(fen)(fen)是鉀、鈉、鈣、鎂等氧(yang)化物(wu)和(he)(he)可(ke)溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)鹽，水(shui)不溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)灰分(fen)(fen)除泥沙(sha)外，還有鐵(tie)、鋁等的(de)(de)(de)氧(yang)化物(wu)和(he)(he)堿(jian)土金(jin)屬的(de)(de)(de)堿(jian)式(shi)磷酸鹽。酸不溶(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)(xing)(xing)灰分(fen)(fen)大部(bu)分(fen)(fen)為污染摻入(ru)的(de)(de)(de)泥沙(sha)和(he)(he)原來(lai)存在(zai)于動植(zhi)物(wu)組織(zhi)中經(jing)灼(zhuo)燒(shao)成(cheng)的(de)(de)(de)二氧(yang)化硅(gui)。

5.1 測定原理

飼料(liao)(liao)中灰(hui)分的(de)測定一般采用灰(hui)化法。將(jiang)試樣在(zai)550℃燒灼，使構成飼料(liao)(liao)有機物的(de)主(zhu)要元(yuan)素C、N、H、等氧化，所(suo)余殘渣即飼料(liao)(liao)中所(suo)含(han)各種礦物元(yuan)素的(de)氧化物、氯(lv)化物及碳酸(suan)鹽，以(yi)及混雜在(zai)飼料(liao)(liao)中粘土、砂粒等，稱為粗灰(hui)分。

5.2 儀器設備

樣品粉(fen)碎機，分析天平（感量0.0001g），電爐，坩堝(guo)鉗，馬福爐，瓷坩堝(guo)(50ml)，干燥(zao)器（變色硅(gui)膠(jiao)作干燥(zao)劑）、40目分樣篩。

5.3 試劑及配制：0.5%氯(lv)化(hua)鐵(tie)墨水(shui)溶液（稱0.5g氯(lv)化(hua)鐵(tie)溶于100ml藍墨水(shui)中(zhong)）

5.4 測定步驟

5.4.1 將(jiang)帶蓋坩堝(guo)洗凈烘干后，用鋼(gang)筆蘸0.5%氯化鐵墨水溶液編號。

5.4.2 將坩堝和(he)蓋一(yi)起放入(ru)馬(ma)福爐，在(zai)550℃±20℃下灼燒30min，稱重再(zai)重復灼燒，冷卻、稱重，直至兩次重量(liang)之差(cha)小于0.0005g為恒重量(liang)。

5.4.3 在(zai)已知(zhi)重量的(de)坩堝中稱(cheng)取2g左右試樣(yang)（不超過坩堝容量的(de)一半(ban)，灰分重量應在(zai)0.05g以上(shang)(shang)），在(zai)電爐上(shang)(shang)低溫碳化至(zhi)無煙(yan)為止。

5.4.4 炭化后將坩堝移(yi)入馬福爐(lu)中，于550℃下灼燒3h，使全(quan)部樣品變成(cheng)灰白(bai)色或紅棕色（含有錳）。待(dai)灰化結束后，待(dai)爐(lu)溫降至(zhi)200℃下時打開爐(lu)門(men)，將坩堝取出于空氣中冷卻(que)1min.，放入干燥(zao)器(qi)中冷卻(que)30min，稱重(zhong)。再(zai)同(tong)樣灼燒1h，冷卻(que)，稱重(zhong)，直至(zhi)兩次重(zhong)量(liang)之差小于0.001g 為(wei)恒重(zhong)量(liang)。

5.5 結果計算

5.5.1 計算公式(shi)：

粗灰分=(W2-W0)/(W1-W0)*100%

式中(zhong)：W0為已恒重量空坩堝重（g）；W1為坩堝加試樣(yang)重（g）；W0為灰化(hua)后坩堝加灰分重(g)。

5.5.2 重復性：每個試樣(yang)應取兩個平(ping)行(xing)樣(yang)進行(xing)測定(ding)，以其算術平(ping)均值為結果。

粗灰分(fen)含量在10%以上，允許(xu)(xu)相對(dui)(dui)偏差為0.5%；粗灰分(fen)含量在5-10%以上，允許(xu)(xu)相對(dui)(dui)偏差為1%；粗灰分(fen)含量在5%以下(xia)，允許(xu)(xu)相對(dui)(dui)偏差為5%。

5.6 注意事項

5.6.1 樣品(pin)(pin)開始炭(tan)化時，應打(da)開部(bu)分坩堝蓋，便于氣流流通；溫度應逐漸上(shang)升(sheng)，防(fang)止火力(li)過大(da)而使部(bu)分樣品(pin)(pin)顆(ke)粒被逸出的氣體帶走。

5.6.2 為(wei)了避免樣品(pin)氧化不足，不應把(ba)樣品(pin)磨得(de)太細，壓得(de)過緊，樣品(pin)應松松地放在坩堝內。

5.6.3 灼燒溫度不(bu)宜(yi)超過600℃，否則會引起磷、硫等鹽的揮發(fa)。

5.6.4 灼燒殘渣顏色(se)與(yu)試樣中各元(yuan)素(su)含(han)量有關，含(han)鐵高時(shi)為(wei)(wei)紅棕色(se)，含(han)錳高為(wei)(wei)淡藍色(se)。但(dan)有明顯黑色(se)炭粒(li)時(shi)，為(wei)(wei)炭化不完全，應延長灼燒時(shi)間。

飼料(liao)中純蛋(dan)白質（真蛋(dan)白）的測定(ding)

一、測定原理

飼料蛋白質(zhi)經沸水(shui)提取并在堿性溶液中被(bei)硫(liu)酸銅沉淀。過濾和洗(xi)滌后，可(ke)將(jiang)純蛋白質(zhi)和非蛋白質(zhi)含氮物分離，再(zai)用凱(kai)氏(shi)定氮法測定沉淀物中的蛋白質(zhi)含量(liang)。

二、儀器設備

（1）燒杯：200ml

（2）定型濾紙

（3）其他設備(bei)與粗蛋白(bai)質測定法相同(tong)

三、試劑與配制

（1）100g.L-1硫酸(suan)銅溶(rong)液；分析純硫酸(suan)銅（5水硫酸(suan)銅）10g溶(rong)于100ml水中

（2）25g.L-1氫氧化(hua)鈉(na)溶(rong)液：將2.5g分(fen)析(xi)純(chun)氫氧化(hua)鈉(na)溶(rong)于100ml水中

（3）10g.L-1氯(lv)化(hua)鋇(bei)溶液：1g氯(lv)化(hua)鋇(bei)溶于100ml水中

（4）2mol.L鹽酸溶(rong)液(ye)

（5）其他試劑與粗蛋白質測定(ding)法相(xiang)同

四、測定步驟

準確稱(cheng)取試(shi)樣1g左右（精確至(zhi)0.0001g）置于(yu)200ml燒杯中，加50ml水中，加熱至(zhi)沸。

加入20ml硫(liu)酸銅溶(rong)(rong)液(ye)(ye)，20ml氫氧化鈉溶(rong)(rong)液(ye)(ye)，用玻璃棒充分攪拌，放置1h以上(shang)。用定性(xing)濾(lv)紙(zhi)過(guo)濾(lv)，然后(hou)用60~80攝氏(shi)度(du)熱(re)水洗滌沉(chen)淀5或6次，用氯(lv)化鋇溶(rong)(rong)液(ye)(ye)5滴(di)和鹽酸溶(rong)(rong)液(ye)(ye)1滴(di)檢查濾(lv)紙(zhi)，直至不(bu)生成白色(se)硫(liu)酸鋇沉(chen)淀為(wei)止。將沉(chen)淀和濾(lv)紙(zhi)放在65攝氏(shi)度(du)烘(hong)箱(xiang)干(gan)燥2h，然后(hou)全部轉(zhuan)移到凱氏(shi)燒瓶中，按半(ban)微(wei)量凱氏(shi)定氮法(fa)進行氮的測定。

本標(biao)準參照采(cai)用國際(ji)標(biao)準ISO 6490/2－1983《動物飼料——鈣含量測定——原子吸收分光光度法》。

　　1　主(zhu)題內容與適用范圍

　　本標(biao)準(zhun)規定(ding)了用原子吸收分(fen)光(guang)光(guang)度(du)法(fa)和(he)滴(di)定(ding)法(fa)測定(ding)食(shi)品中鈣(gai)。

　　本標(biao)準適用于(yu)各(ge)種食品中鈣的(de)測定(ding)。

　　第一(yi)篇　原子吸收(shou)分(fen)光光度法

　　2　原理

　　樣(yang)品經濕消化后(hou)，導(dao)進原子(zi)吸收分光光度計中(zhong)，經火焰原子(zi)化后(hou)，吸收422.7nm的(de)共振(zhen)線(xian)，其吸收量(liang)(liang)與含量(liang)(liang)成正比(bi)，與標準系列比(bi)較定量(liang)(liang)。

　　3　試劑

　　要(yao)求使用(yong)往(wang)離子(zi)水，優(you)級(ji)純試劑。

　　3.1　鹽酸(GB 622)。

　　3.2　硝(xiao)酸(GB 626)。

　　3.3　高氯酸(GB 623)。

　　3.4　混合酸(suan)消化液(ye)：硝酸(suan)與高氯酸(suan)比為4∶1。

　　3.5　0.5N硝酸(suan)溶液：量(liang)取45mL硝酸(suan)，加往離(li)子(zi)水并稀釋(shi)至1000mL。

　　3.6　2%氧化(hua)鑭溶(rong)液(ye)：稱取25g氧化(hua)鑭(純度(du)大于(yu)99.99%)，加75mL鹽酸于(yu)1000mL容(rong)量瓶中，加往離子水(shui)稀釋至刻(ke)度(du)。

　　3.7　鈣(gai)標(biao)準溶液(ye)：精確稱(cheng)取1.2486g碳酸鈣(gai)(純度大于(yu)99.99%)，加(jia)50mL往離子水(shui)，加(jia)鹽酸溶解，移進1000mL容量瓶(ping)中，加(jia)2%氧(yang)化鑭稀釋(shi)至(zhi)刻(ke)度。貯存(cun)于(yu)聚乙烯瓶(ping)內，4℃保存(cun)。此溶液(ye)每毫升相當于(yu)500μg鈣(gai)。

　　3.8　鈣標準使(shi)用(yong)液：鈣標準使(shi)用(yong)液的配制見表1。

　　表(biao)1　鈣標準使(shi)用(yong)液配制

　　鈣標準使用(yong)液配制后(hou)，貯存于聚乙烯(xi)瓶內，4℃保存。

　　4　儀器與設備

　　所用(yong)玻璃儀(yi)器均以硫酸－重(zhong)鉻酸鉀洗液浸泡數小(xiao)時，再用(yong)洗衣(yi)粉充(chong)分洗刷，后用(yong)水(shui)反(fan)復沖洗，最后用(yong)往離子水(shui)沖洗曬(shai)干或烘干，方可(ke)使用(yong)。

　　4.1　實驗室常用設備。

　　4.2　原子吸(xi)收分光(guang)光(guang)度計。

　　5　操縱步驟

　　5.1　樣品處(chu)理

　　5.1.1　樣(yang)品制備

　　微量元素分(fen)析(xi)的(de)樣品(pin)(pin)制(zhi)備過程(cheng)中應(ying)特別留意防(fang)止(zhi)各(ge)種污(wu)染。所用(yong)設備如(ru)電磨、絞肉機、勻漿(jiang)器、打壞機等必須是不(bu)銹鋼制(zhi)品(pin)(pin)。所用(yong)容(rong)器必須使用(yong)玻璃或聚乙烯制(zhi)品(pin)(pin)，做鈣測(ce)定的(de)樣品(pin)(pin)不(bu)得(de)用(yong)石磨研碎。濕樣(如(ru)蔬菜、水果、鮮(xian)魚、鮮(xian)肉等)用(yong)水沖洗干(gan)(gan)凈(jing)后，要用(yong)往離(li)子水充(chong)分(fen)洗凈(jing)。干(gan)(gan)粉(fen)類樣品(pin)(pin)(如(ru)面粉(fen)、奶粉(fen)等)取樣后立即裝容(rong)器密(mi)封保存，防(fang)止(zhi)空氣中的(de)灰塵和(he)水分(fen)污(wu)染。

　　5.1.2　樣品(pin)消化(hua)

　　精確稱取(qu)均勻樣品干樣0.5～1.5g(濕樣2.0～4.0g，飲料等液(ye)體樣品5.0～10.0g)于(yu)250mL高型燒杯(bei)(bei)，加(jia)混(hun)合酸(suan)消(xiao)化(hua)液(ye)20～30mL，上蓋表皿。置于(yu)電熱板或電沙浴上加(jia)熱消(xiao)化(hua)。如未消(xiao)化(hua)好而酸(suan)液(ye)過(guo)少時(shi)，再(zai)補加(jia)幾毫升混(hun)合酸(suan)消(xiao)化(hua)液(ye)，繼續加(jia)熱消(xiao)化(hua)，直至無色透(tou)明為止。加(jia)幾毫升往離(li)子水(shui)(shui)，加(jia)熱以(yi)除(chu)往多(duo)余(yu)的硝酸(suan)。待(dai)燒杯(bei)(bei)中的液(ye)體接近(jin)2～3mL時(shi)，取(qu)下(xia)冷(leng)卻。用往離(li)子水(shui)(shui)洗并轉移于(yu)10mL刻(ke)度(du)試管中，加(jia)往離(li)子水(shui)(shui)定(ding)容(rong)至刻(ke)度(du)(測鈣時(shi)用2%氧化(hua)鑭溶液(ye)稀(xi)釋定(ding)容(rong))。

　　取(qu)與消化(hua)樣品(pin)相同量的混合(he)酸(suan)消化(hua)液(ye)，按上(shang)述操縱做試劑空缺試驗測定。

　　5.2　測定

　　將(jiang)鈣(gai)、標(biao)準使用液分別配制不同(tong)濃度系列的標(biao)準稀釋(shi)液，見(jian)表2，測定操(cao)縱(zong)參(can)數見(jian)表3。

　　表2　不同濃度系列標準(zhun)稀釋液的配制方(fang)法

　　（圖略）

　　表3　測定操縱(zong)參數(shu)

　　（圖略）

　　其他實驗(yan)條(tiao)件(jian)：儀器(qi)狹縫、空(kong)氣及乙快的流量、燈頭高度、元素燈電流等均按使用的儀器(qi)說(shuo)明調至最佳(jia)狀態。

　　將消化好(hao)的樣液(ye)、試劑空缺液(ye)和(he)各元(yuan)素的標(biao)準濃(nong)度系列(lie)分別導進火(huo)焰進行測定。

　　5.3　計算

　　5.3.1　標準曲線法

　　以各(ge)濃(nong)度系列標(biao)(biao)準溶液(ye)與(yu)對應(ying)的(de)(de)吸光度繪制(zhi)標(biao)(biao)準曲線。鈣標(biao)(biao)準曲線如(ru)圖1所(suo)示。它的(de)(de)線性相(xiang)關系數為0.9996。

　　（圖略）

　　測定用樣(yang)品液及(ji)試劑空缺液由標準曲(qu)線查出(chu)濃度值(c及(ji)c0，再按式(1)計(ji)算。

　　式中(zhong)：X——樣品中(zhong)元素的含(han)量，同mg/100g；

　　c——測定用樣(yang)品中(zhong)元素(su)的濃(nong)度(由標(biao)準曲線查出)，μg/mL；

　　c0——試劑空缺液中元素的濃度(由標(biao)準(zhun)曲(qu)線查出)，μg/mL；

　　V——樣品定容體積，mL；

　　f——稀釋(shi)倍數；

　　m——樣(yang)品質量(liang)，g；

　　（圖略）

　　5.3.2　回回方(fang)程法(fa)

　　由各元素標(biao)準(zhun)稀釋液濃度(du)與對應(ying)的吸光(guang)度(du)計算(suan)出(chu)回(hui)(hui)回(hui)(hui)方(fang)程(也可(ke)以輸進計算(suan)器得出(chu)回(hui)(hui)回(hui)(hui)方(fang)程)，計算(suan)見(jian)式(2)。

　　c＝ay＋b……………………………………………(2)

　　式中：c——測定用(yong)樣品(pin)中元素(su)的濃度(可由計算器直接得出，μg/mL)；

　　a——曲線斜(xie)率(lv)；

　　y——元素的吸收度；

　　b——曲線的截距。

　　由回(hui)回(hui)方程或計算器(qi)得出測定樣液及試(shi)劑空缺液的(de)濃度(du)后(hou)，再由式(3)計算。

　　式中各字母的含義同曲(qu)線法說明。

　　5.3.3　結果的(de)重復性(xing)

　　同實驗室(shi)平行測(ce)定或連續(xu)兩次測(ce)定結果的(de)重現性鈣小(xiao)于10%。

　　最低(di)檢測限：鈣0.1μg。

　　第二(er)篇　滴定法(EDTA法)

　　6　原理

　　鈣與(yu)氨(an)羧絡(luo)合(he)(he)劑(ji)(ji)能定(ding)量地形成金屬(shu)絡(luo)合(he)(he)物(wu)，其穩定(ding)性較鈣與(yu)指(zhi)(zhi)示劑(ji)(ji)所形成的絡(luo)合(he)(he)物(wu)為強。在適當的pH值范(fan)圍內(nei)，以氨(an)羧絡(luo)合(he)(he)劑(ji)(ji)EDTA滴定(ding)，在達到當量點(dian)時(shi)，EDTA就自指(zhi)(zhi)示劑(ji)(ji)絡(luo)合(he)(he)物(wu)中奪取(qu)鈣離子(zi)，使溶(rong)液(ye)呈現游離指(zhi)(zhi)示劑(ji)(ji)的顏色(終點(dian))。根(gen)據(ju)EDTA絡(luo)合(he)(he)劑(ji)(ji)用量，可計(ji)算鈣的含(han)量。

　　7　試劑

　　要求(qiu)使用往離子水，優級純(chun)試(shi)劑。

　　7.1　1.25mol/L氫氧化(hua)鉀溶液(ye)：精確稱取71.13g氫氧化(hua)鉀，用往離子水稀釋至1000mL。

　　7.2　1%氰化(hua)鈉溶液：稱取1.0g氰化(hua)鈉，用往(wang)離子水稀釋至100mL。

　　7.3　0.05mol/L檸(ning)檬酸鈉(na)溶(rong)液：稱取(qu)14.7g檸(ning)檬酸鈉(na)(Na3C6H5O7·2H2O)，用往離子水稀(xi)釋至1000mL。

　　7.4　混合(he)酸消(xiao)化(hua)液：硝酸(GB 626)與(yu)高(gao)氯酸(GB 623)比為(wei)4∶1。

　　7.5　EDTA溶液：精(jing)確稱(cheng)取(qu)4.50g EDTA(乙(yi)二胺四乙(yi)酸二鈉)，用(yong)往(wang)離子水(shui)稀釋至1000mL，貯存于聚乙(yi)烯(xi)瓶中(zhong)，4℃保存。使用(yong)時稀釋10倍即可(ke)。

　　7.6　鈣標(biao)準溶(rong)液：精確稱取0.1248g碳(tan)酸鈣(純度(du)(du)大(da)于99.99%，105～110℃烘干(gan)2h)，加20mL往離子水及3mL 0.5mol/L鹽酸溶(rong)解，移進500mL容量(liang)瓶(ping)中，加往離子水稀(xi)釋至刻度(du)(du)，貯存于聚乙烯瓶(ping)中，4℃保(bao)存。此(ci)溶(rong)液每毫升相當于100μg鈣。

　　7.7　鈣紅指示(shi)劑(ji)：稱取0.1g鈣紅指示(shi)劑(ji)(C21O7N2SH14)，用往離子(zi)水稀釋至100mL，溶解后即可(ke)使用。貯存(cun)干冰箱(xiang)中可(ke)保(bao)持一個(ge)半(ban)月以上。

　　8　儀器與設備

　　所有玻璃儀器(qi)均(jun)以硫(liu)酸－重鉻酸鉀洗液浸泡(pao)數小時(shi)，再用(yong)洗衣粉(fen)充分(fen)洗刷，后用(yong)水反復沖洗，最后用(yong)往離子水沖洗曬干或(huo)烘(hong)干，方可使(shi)用(yong)。

　　8.1　實驗室常(chang)用玻璃儀器：高(gao)型(xing)燒杯(250mL)，微(wei)量滴定管(guan)(guan)(1或2mL)，堿(jian)式滴定管(guan)(guan)(50mL)，刻度吸(xi)管(guan)(guan)(0.5～1mL)，試管(guan)(guan)等(deng)。

　　8.2　電熱板(ban)：1000～3000W，消化樣品用。

　　9　樣品制備

　　同第一篇。

　　10　操縱步驟

　　10.1　樣品消化

　　同第一篇。

　　10.2　測定

　　10.2.1　標定EDTA濃度

　　吸取0.5mL鈣(gai)標(biao)準溶液，以EDTA滴定，標(biao)定其EDTA的濃度，根據滴定結果計(ji)算出每毫升EDTA相當于鈣(gai)的毫克(ke)數，即滴定度(T)。

　　10.2.2　樣品及空缺滴定(ding)

　　吸取(qu)0.1～0.5mL(根(gen)據(ju)鈣(gai)的含量而定(ding))樣品消(xiao)化液及(ji)空缺于試管中，加(jia)(jia)1滴(di)氰(qing)化鈉(na)(na)溶液和0.1mL檸(ning)檬酸鈉(na)(na)溶液，用(yong)滴(di)定(ding)管加(jia)(jia)1.5mL 1.25mol/L氫氧(yang)化鉀溶液，加(jia)(jia)3滴(di)鈣(gai)紅指示劑，立即(ji)以稀(xi)釋10倍EDTA溶液滴(di)定(ding)，至指示劑由紫紅色變(bian)藍為止。

　　10.3　計算

　　樣品(pin)中該元素的(de)含量按式(4)計算：

　　式中：X——樣品中元素含量，mg/100g；

　　T——EDTA滴定度，mg/mL；

　　V——滴定樣品(pin)時所用EDTA量，mL；

　　V0——滴定空缺時所用EDTA量，mL；

　　f——樣品稀釋倍數；

　　m——樣品稱(cheng)重量，g。

　　11　結果的重復性(xing)

　　同實(shi)驗(yan)室(shi)平行測定或連續兩次測定結果(guo)的重復(fu)性小(xiao)于10%。

　　本方法的檢測范(fan)圍：5～50μg。